編號:PV-6000D
DAB染色液(聚合物法)
詳詢(xún)
詳細信息:
分類(lèi): | 檢測系統 |
子分類(lèi): | 非生物素法檢測系統 |
主要成分: | 試劑1:內源性過(guò)氧化物酶阻斷劑 試劑2:酶標羊抗鼠/兔IgG聚合物 試劑3:DAB底物緩沖液 試劑4:DAB濃縮顯色液 |
檢驗方法: | 1、檢驗所需儀器和耗材:移液器、恒溫箱、修復儀、免疫組化筆、計時(shí)器、孵育盒、染色架、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、洗瓶。 2、試劑準備:DAB顯色液需要在使用前配制。配制方法:在小試管中依次滴加底物緩沖液1mL,濃縮顯色液(棕褐色液體)50μL,混勻。配置好的DAB顯色液2~8℃避光存放,現配現用。 3、操作程序: a) 脫蠟和水化 石蠟切片置于新鮮二甲苯中,浸泡10分鐘×3次;去除多余的液體后,置于無(wú)水乙醇中,浸泡3分鐘×3次;去除多余的液體后,置于95%乙醇中,浸泡3分鐘×2次;去除多余的液體后,置于75%乙醇中,浸泡3分鐘×2次;蒸餾水沖洗1分鐘,置于PBS緩沖液中。 b) 抗原修復,參見(jiàn)一抗說(shuō)明書(shū)。 c) 阻斷內源性過(guò)氧化物酶 加入適量的內源性過(guò)氧化物酶阻斷劑,室溫孵育10分鐘;PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。 d) 滴加一抗 根據組織大小,滴加100μL或適量的一抗,37℃孵育60分鐘或2~8℃過(guò)夜;PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。 e) 滴加酶標羊抗鼠/兔IgG聚合物 滴加100μL或適量的酶標羊抗鼠/兔IgG聚合物,室溫孵育20分鐘;PBS緩沖液沖洗3分鐘×3次。 f) DAB顯色 加入適量新鮮配制的DAB顯色液,室溫孵育5~8分鐘。 g) 復染 自來(lái)水沖洗,蘇木素染色液孵育30~60秒;分化、沖洗返藍。 h) 脫水、透明、封片 i) 閱片。 4、結果判定,染色結果須由有資質(zhì)的病理醫生對染色后的組織片在光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察并進(jìn)行判讀。 |
預期用途: | 主要用于免疫組織化學(xué)染色的顯色。 |
儲存/效期: | 2~8℃避光保存,有效期18個(gè)月。采用泡沫箱加冰袋密封的運輸方式,時(shí)間不大于7天,開(kāi)箱溫度不超過(guò)30℃,產(chǎn)品性能無(wú)影響。 使用時(shí)應即拿即放,使用后,應立即放回冰箱,開(kāi)封后試劑有效期6個(gè)月;現配現用,配好后避光保存。 |