編號：DS-0004
雙染檢測試劑（抗小鼠IgG/AP+抗兔IgG/HRP）
詳詢(xún)
詳細信息：
| 分類(lèi)： | 檢測系統 |
| 子分類(lèi)： | DS雙染試劑盒 |
| 規格： | 60測試/盒,120測試/盒 |
| 主要成分： | 試劑1 內源性過(guò)氧化物酶阻斷劑 試劑2 即用型組合二抗（HRP標記抗兔IgG+AP標記抗小鼠IgG） 試劑3 顯色劑3A 顯色劑3B 試劑4 顯色劑4A 顯色劑4B |
| 檢驗方法： | 1) 脫蠟和水化石蠟切片置于新鮮二甲苯中，2缸，浸泡10分鐘/缸；去除多余的液體后，置于無(wú)水乙醇中，2缸，浸泡2分鐘/缸；去除多余的液體后，置于95%乙醇中，1缸，浸泡2分鐘；去除多余的液體后，置于75%乙醇中，1缸，浸泡2分鐘；去除多余的液體后，蒸餾水沖洗，置于Ultra沖洗緩沖液中。 2) 抗原修復 高壓鍋中，加入EDTA抗原修復液，高火預熱；待修復液沸騰后將切片置于其中，并完全浸泡組織，蓋好鍋蓋，扣上壓力閥，高火繼續加熱；待限壓閥開(kāi)始轉動(dòng)噴氣后調至中火，同時(shí)開(kāi)始計時(shí)2.5分鐘；計時(shí)結束后離開(kāi)熱源，放氣降壓后將高壓鍋移入冷水中冷卻；待鍋中液體冷卻至室溫后取出切片，Ultra沖洗緩沖液浸泡清洗2分鐘×3次。 3) 滴加試劑1 加入50μL的試劑1（內源性過(guò)氧化物酶阻斷劑），室溫孵育10分鐘；蒸餾水洗2次后甩干液體，用免疫組化筆在距離組織周?chē)?-3mm處畫(huà)圈；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。 4) 根據檢測需要滴加50μL 組合一抗或空白對照試劑，37℃孵育60分鐘或2～8℃孵育過(guò)夜；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。 5) 滴加試劑2 滴加50μL 試劑2，37℃孵育30分鐘；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。 6) 滴加試劑3 滴加50μL試劑3，室溫孵育10-15min；Ultra沖洗緩沖液浸泡2分鐘×3次。 7) 滴加試劑4 滴加50μL試劑4，室溫孵育5-10min；自來(lái)水沖洗。 8) 復染 蘇木素染色液室溫染色30～60秒，自來(lái)水沖洗干凈，晾干。注意：需要控制蘇木素染色液的染色強度。顏色過(guò)淺或過(guò)深都會(huì )干擾顯色結果的觀(guān)察。 9) 水洗后返藍 10) 快速脫水、透明、中性樹(shù)膠封片。 11) 結果判讀 在光學(xué)顯微鏡下對染色后切片進(jìn)行觀(guān)察和結果判讀。 |
