【斷據】2016年NordiQC B22輪Ki67測評簡(jiǎn)介（UltraMAB抗體UMAB107喜獲推薦）

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2016-12-16 中杉金橋

在剛剛結束的NordiQC乳腺癌Ki67測評中，由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供的高敏感和特異性的自主研發(fā)品牌抗體Ki67（克隆號：UMAB107）取得了優(yōu)異的成績(jì)，并最終被NordiQC作為優(yōu)秀抗體進(jìn)行了推薦。

此次測評所使用的標本除了三個(gè)細胞標本（不參與評分）外，還包括：

No.	材料	Ki67 proliferation index
1.	胰腺	< 1% 外分泌腺及導管上皮細胞
5.	肝臟	< 1% 肝細胞
6.	扁桃體	80-90%生發(fā)中心B細胞
7.	乳腺導管癌	20-30%
8.	乳腺導管癌	70-80%
9.	乳腺導管癌	5-10%

優(yōu)片評定標準如下：

• 80-90%生發(fā)中心B細胞（明區和暗區）和絕大多數的基底上層鱗狀上皮細胞呈現中等至強的異質(zhì)性細胞核染色；
• 胰腺外分泌腺和大的導管散在的上皮細胞呈現中等至強的異質(zhì)性細胞核染色；
• 在三個(gè)乳腺癌標本中呈現與所示ki67增值指數相符的中等至強的異質(zhì)性細胞核染色；
• 僅有小于1%的散在的肝細胞核染色；
• 所有標本無(wú)或僅有很微弱的背景和細胞質(zhì)染色。

有409家實(shí)驗室參加了本次測評，93%取得了優(yōu)良的成績(jì)。最常見(jiàn)導致染色不佳的原因包括：不適當的抗原熱修復；一抗濃度過(guò)低。同以往的Ki67測試相同，不佳的染色主要表現在太弱或假陰性，造成Ki67增殖指數（PI）下降。實(shí)際上所有的實(shí)驗室均可以證明像暗區生發(fā)中心B細胞這樣Ki67高表達的細胞，但是位于明區Ki67低表達細胞才是校準實(shí)驗步驟的最佳依據，對于這些明區B細胞的弱染色或假陰性染色可以直接影響到對于乳腺癌Ki-67增值指數的結果。有78%的不合格染色存在上述問(wèn)題。另外，其它不合格的染色還包括伴背景染色的弱陽(yáng)性、形態(tài)受損或過(guò)度復染。

本次測試一共有150家實(shí)驗室使用濃縮型抗體。已被證實(shí)具有良好特性的小鼠單抗MIB-1和兔單抗SP6依然是最為廣泛使用的抗體，也取得了良好的染色結果，但是新近問(wèn)世的小鼠單抗BS4、GM001、K2和UMAB107亦可提供優(yōu)質(zhì)的染色結果。除外抗體因素，有效的抗原熱修復和對一抗的仔細校準是獲得良好結果的關(guān)鍵所在。檢測系統的選擇所占的權重并不重要，無(wú)論是二步法還是三步法聚合物檢測系統在一抗調整合適的基礎上均可獲得滿(mǎn)意的結果。

對于最為常用的小鼠單抗MIB-1，在來(lái)自Dako、Leica和Ventana的三大染色平臺上均可以獲得優(yōu)秀的成績(jì)。但是原因不明的是，MIB-1在Leica的Bond免疫組化平臺上較之其它兩個(gè)平臺結果遜色，盡管使用了靈敏的三步聚合物檢測系統，僅有31%的實(shí)驗室獲得了“優(yōu)秀”的成績(jì)，甚至有19%的實(shí)驗室被評為不合格。與之相對應的是，在Dako免疫組化檢測平臺中上述兩組數據分別對應的是80%和0%。從上傳提交的步驟上并不能給出出現這種差異的理由。

從本次測評并結合以往的Ki67測試來(lái)看，闌尾被推薦用于作為Ki67檢測的陽(yáng)性和陰性對照，生發(fā)中心暗區幾乎所有的B細胞都必須為中等至強的細胞核染色，而明區的多數B細胞亦應至少呈現弱至中等強度的細胞核染色，在套區B細胞絕大多數無(wú)染色。肝臟和胰腺可以作為補充性陰性對照，小于1%的肝細胞和胰腺外分泌腺上皮細胞應為陽(yáng)性（感染性和反應性條件下可以產(chǎn)生Ki67增殖指數的升高，白細胞也可不明原因地出現微弱的細胞核染色反應）。以上推薦與國際專(zhuān)家特設委員會(huì )已發(fā)表的指南中所推薦的對照一致。

總之，小鼠單抗BS4、GM001、K2、MIB-1、UMAB107和兔單抗30-9、SP6均被推薦用于Ki67的檢測，有效的抗原熱修復是必需的，同時(shí)在敏感性和形態(tài)的完好性之間要達到很好的平衡。

圖1 Ki67在扁桃體中的正確表達

圖2 Ki-67在胰腺中的正確表達

UltraMAB技術(shù)

UltraMAB技術(shù)是美國Origene集團公司獨家擁有的保證抗體高特異性和靈敏度技術(shù)。Origene公司擁有全球最大的cDNA克隆文庫，利用哺乳動(dòng)物表達系統，已成功克隆出近2萬(wàn)個(gè)最接近天然活性的人類(lèi)已知功能蛋白，這就從根本上保證了生產(chǎn)抗體的最高敏感度。同時(shí)，Origene公司又把所有蛋白制作成蛋白芯片，用來(lái)檢測生產(chǎn)抗體的特異性。因此，UltraMAB技術(shù)可以保證生產(chǎn)抗體最高的靈敏度和特異性。